技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES有了質(zhì)量好的抗原,還必須選擇適當(dāng)?shù)拿庖咄緩?,才能對抗體制備質(zhì)量好(特異性強和效價高)的抗體。今天我們來看看佐劑的配制:由于不同個體對同一抗原的反應(yīng)性不同,而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力也有強有弱,因此常常在注射抗原的同時,加入能增強抗原的抗原性物質(zhì),以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應(yīng),這種物質(zhì)稱為免疫佐劑。佐劑除了延長抗原在體內(nèi)的存留時間,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),使參與免疫反應(yīng)的免疫活性細胞增多,促進T細胞與B細胞的相互作用,從而增強機體對抗原的細胞免...
本文由艾柏森生物提供從培養(yǎng)液或腹腔積液獲得的單克隆抗體,不需要純化即可應(yīng)用于日常診斷或定性研究。如果用于免疫標(biāo)記測定,須分離和純化??捎冒腼柡?、飽和硫酸銨進行沉淀,進行初步濃縮和純化;可用親和層析法進一步純化。一、腹水型單抗的純化在單抗純化之前,一般均需對腹水進行預(yù)處理,目的是為了進一步除去細胞及其殘渣、小顆粒物質(zhì)、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和過濾離心法,以前者處理效果為佳,而且操作簡便。1、二氧化硅吸附法新鮮采集的腹水(或凍存的腹水),2000r/min15分...
在重組蛋白中,常常將目的蛋白N端或C端與其他特定蛋白、多肽或寡肽標(biāo)簽進行融合表達,形成既能保留天然蛋白的大部分結(jié)構(gòu),又能實現(xiàn)增溶,防降解,促進分泌,便于純化的功能;本文簡要介紹生物藥研發(fā)生產(chǎn)過程中常見的融合蛋白標(biāo)簽;一、純化標(biāo)簽His標(biāo)簽His標(biāo)簽是當(dāng)前流行的標(biāo)簽蛋白。His標(biāo)簽是指六個組氨酸殘基組成的融合標(biāo)簽,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當(dāng)某一個標(biāo)簽的使用,一是能構(gòu)成表位利于檢測;二是構(gòu)成*的結(jié)構(gòu)特征(結(jié)合配體)利于純化。其特點可總結(jié)為以下幾點:1.標(biāo)簽的分子量小,只...
艾柏森生物科技有限公司作為值得信賴的抗體研發(fā)服務(wù)供應(yīng)商,擁有專業(yè)的技術(shù)團隊,可為客戶提供的抗體測序服務(wù)。艾柏森生物打造的全新一代抗體測序平臺,基于蔦槍法與抗體數(shù)據(jù)庫相結(jié)合的技術(shù)“DatabaseAssistedShotgunSequencing”(DASS)技術(shù),這項技術(shù)還適用于其他亞型和不同形式的抗體,如:IGM,熒光偶聯(lián)抗體,固定化抗體,不同物種的抗體等。等重氨基酸測序與其它基于MS測序方法不同的是,我們可以分辨大多數(shù)等重氨基酸復(fù)合物★W可與GE、AD、SV區(qū)分★R可從G...
技術(shù)介紹:X-射線分辨單克隆抗體-抗原復(fù)合物是分析單克隆抗體識別表位的可靠方法,該方法基于對單克隆抗體-抗原共晶體衍射的X-射線束的強度和角度測量,再用生物信息學(xué)的方法確定原子坐標(biāo),將復(fù)合體的三維結(jié)構(gòu)完整可視化。抗原表位分析對抗體人源化改造,抗體親和力提高,抗體穩(wěn)定性改造,發(fā)現(xiàn)新的功能表位,改變抗體特異性,設(shè)計新抗體,基于抗原-抗體相互作用的立體構(gòu)型設(shè)計新型功能分子改造抗體都很重要。應(yīng)用該方法首先需獲得純度較高的抗原、抗體,并使其相互作用形成共晶,但由于成本及技術(shù)要求較高,難...
蛋白的酵母雙雜交實驗是以酵母的遺傳分析為基礎(chǔ),研究蛋白間相互作用的一種有效技術(shù)手段。轉(zhuǎn)錄活化蛋白可以和DNA上特異的序列結(jié)合而啟動相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。這種DNA結(jié)合與轉(zhuǎn)錄激活的功能是由其上兩個相互獨立的結(jié)構(gòu)域,即DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(BindingDomain,BD)和轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域(ActivationDomain,AD)共同完成的。以Gal4系統(tǒng)為例,BD和AD分別由Gal4蛋白上不同的兩個結(jié)構(gòu)域(1-147aa與768-881aa)構(gòu)成。在利用GAL4系統(tǒng)篩選cDNA文庫或...
熒光原位雜交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,按照堿基互補的原則直接雜交結(jié)合到待檢測染色體或單鏈核酸上,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。進行定性、定位、相對定量分析。FISH技術(shù)優(yōu)勢:操作簡單、檢測快速、結(jié)果易觀察、可檢測多種類樣品、空間定位準(zhǔn)確、靈敏性和特異性高FISH臨床意義:指導(dǎo)臨床治療及藥物選擇、疾病的分期分型及預(yù)后判斷、形態(tài)學(xué)檢測的輔助手段熒光原位雜交(FISH)的實驗步驟FIS...
原理簡介:原位雜交技術(shù)(insituhybridization)是以標(biāo)記的核酸分子為探針,在組織細胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交,再以放射自顯影或免疫細胞化學(xué)方法對標(biāo)記探針進行探測,從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA??梢愿鞣N種屬的標(biāo)本,包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標(biāo)本。也可以檢測組織芯片。注:為了提高檢測的成功率,請在...
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